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1、 就在《刺客信条：兄弟会》之前，现代刺客德斯蒙德迈尔斯(Desmond Myers)与他的同伴露西斯蒂尔曼(Lucy steelman)、肖恩黑斯廷斯(Sean Hastings)和丽贝卡克莱恩(Rebecca Kline)一起，在朱诺号神庙发现了“第一文明”的古老遗迹“伊甸园的碎片”。德斯蒙德在刺死露西后陷入昏迷，并被送回基因记忆追踪机器“阿尼姆斯2.0”，以避免精神崩溃。

2、 在安全模式“暗室”中，德斯蒙德遇到了第16个实验体的意识，被告知必须输入他的两个刺客祖先阿塔尔伊本拉哈德和埃齐奥奥迪托雷达费伦泽的未读记忆，以便阿尼姆斯2.0将三人的记忆分开，重新组织他们的意识醒来。

3、 在黑暗的房间里，德斯蒙德除了探索记忆，还回忆了自己的过去：他小时候在森林里被训练成一名刺客，但他在16岁渴望自由后逃离了。搭便车到达纽约后，他找了一份酒保的工作，最后被跨国制药公司Abstergo发现并胁迫成为Animus实验体。到目前为止，他后悔没有重视刺客的训练，承认自己是个刺客。

4、 511年3月，52岁的伊乔前往300多年前刺客组织所在的叙利亚城市马西亚夫，发现用作刺客基地的堡垒已被宿敌圣殿骑士占领，并得知阿泰尔在堡垒下的密室中藏了一件圣物，其力量可以永久结束刺客与圣殿骑士之间的战争。

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